4-Nitrophenyl beta-D-galactopyranoside CAS:200422-18-0

Epekto: Ang ONPG usa ka substrate nga espesipikong gigamit aron mamatikdan ang presensya ug kalihokan sa enzyme nga β-galactosidase. Kung ang enzyme nga β-galactosidase anaa ug aktibo, kini mobahin sa ONPG ngadto sa duha ka produkto: o-nitrophenol ug usa ka galactose derivative. Ang pagpagawas sa o-nitrophenol moresulta sa pagkausab sa kolor nga dalag, nga masukod gamit ang spectrophotometer.

Aplikasyon: Ang ONPG adunay daghang aplikasyon sa panukiduki sa molekular nga biyolohiya ug biokemistri:

Pagtino sa kalihokan sa β-galactosidase: Ang ONPG kasagarang gigamit sa pagsukod ug pag-ihap sa kalihokan sa enzyme nga β-galactosidase. Ang gikusgon sa pagporma sa o-nitrophenol, nga direktang proporsyonal sa kalihokan sa enzyme, masukod pinaagi sa spectrophotometrically.

Ekspresyon ug regulasyon sa gene: Ang ONPG kanunay gigamit sa mga eksperimento nga may kalabotan sa mga pagtuon sa ekspresyon ug regulasyon sa gene. Kanunay kini gigamit sa mga fusion protein assay, sama sa kasagarang gigamit nga lacZ fusion system, aron tun-an ang ekspresyon sa mga gene ubos sa kontrol sa piho nga mga promoter. Ang kalihokan sa beta-galactosidase nga gisukod gamit ang ONPG naghatag og mga panabut sa lebel sa ekspresyon sa gene.

Pagsusi sa kalihokan sa β-galactosidase: Ang ONPG magamit isip usa ka colorimetric screening method sa recombinant DNA technology aron mailhan ang presensya ug gamit sa LacZ gene, nga nag-encode sa β-galactosidase. Kini nga pamaagi sa pagsusi makatabang sa pag-ila sa mga clone nga adunay gene nga gikonsiderar.

Mga pagtuon sa kinetika sa enzyme: Ang ONPG mapuslanon usab sa pagtuon sa kinetika sa β-galactosidase enzyme. Pinaagi sa pagsukod sa gikusgon sa reaksyon sa enzyme-substrate sa lainlaing konsentrasyon sa substrate, posible nga mahibal-an ang mga kinetic parameter sama sa Michaelis-Menten constants (Km) ug maximum reaction rates (Vmax).